تکنیکی با قدرت تفکیک بالا جهت تعیین ژنوتیپ HRM یا High Resolution Melting
رستم عبداللهی |
۲۰ خرداد ۱۳۹۶

اخیرا دانشجویان و محققان زیادی در کشور به جای استفاده از تکنیک های SSCP و PCR-RFLP  به فکر استفاده از تکنیک HRM برای تعیین ژنوتیپ فراورده های PCR شده اند تا بتوانند به آسانی ژنوتیپ های هتروزایگوت رو از هموزایگوت ها تشخیص دهند. در همین راستا آقای حمیدرضا امینی مطالب جامعی را جمع آوری کردند تا دوستان دیگر هم بتوانند از فرایند و چکونگی این تکنیک اطلاعات کاملی بدست بیاورند.

مروزه آنالیز پروفایل SNPs و یا هاپلوتیپ­ها، تشخیص ژن­های موثر بر صفات مهم اقتصادی و به ویژه بیماری­ها را امکان پذیر ساخته است، چرا که SNPهای موجود در این ژن­ها می­توانند بر بیان و عملکرد این ژن­ها اثر گذار باشند. از طرفی وجود تکنیک­های موثر و حساس برای شناسایی جهش­های موجود در این ژن­ها و مشخص کردن تفاوت بین این توالی­ها بسیار حائز اهمیت است که بطبع وجود تکنیک­هایی که از لحاظ اقتصادی مقرون به صرفه باشد ضروری است. در این زمینه گرچه تکنیک­های با بازده بسیار بالا، جهت شناسایی این جهش­ها به ویژه در در مطالعات کل ژنوم بسیار پیشرفت کرده­اند، ولی بدون شک از لحاظ اقتصادی راه حل مفیدی برای انجام پروژه­هایی که در آزمایشگاه­های کوچک انجام می­شود نخواهد بود. در این راستا امروزه رنگ­های فلورسنت، امکان تشخیص و آنالیز جهش­های موجود در DNA را با استفاده از منحنی­ نقطه ذوب آن­ها و با قدرت تفکیک­پذیری بالا فراهم کرده است. در این پست هدف آشنایی با تکنیک HRM در آزمایشگاه­های ملکولی به عنوان روش­ دیگر تعیین ژنوتیپ است. HRM، تکنیکی است که در جهت شناسایی جهش­ها، چندشکلی ­ها و تفاوت­های اپیژنتیکی در نمونه DNAهای دورشته­ای استفاده می­شود.

فایل پی دی اف مقاله به همراه اشکال را از لینک زیر دانلود کنید:

High Resolution Melting

 
avatar